泰州市榕兴医疗用品股份有限公司
快速导航 Menu
您所在的位置:首页 > 新闻中心 > 行业资讯 > 正文
行业资讯

海藻酸钙止血敷料与临床常用3种止血敷料体外细胞毒性的比较

编辑:海藻酸钙敷料小编 来源:海藻酸钙敷料官网 发布时间:2017/6/9 9:11:42 浏览:210

摘要 背景:止血敷料是作用于创伤表面与人体组织直接接触,其生物相容性是评价敷料优劣的重要指标之一,以海藻酸钙为原料的制备的止血敷料有着廉价、相容性好等优点己成为研究的热点。 目的:观察海藻酸钙止血敷料的细胞毒性 ,并与明胶止血海绵、纳吸棉、普通纱布等材料作对 比。 方法:1浸提液法:以DMEM高糖培养液作为浸提介质,分别制备海藻酸钙止血敷料、明胶止血海绵、纳吸 棉、普通纱布浸提液,并设置 1O0%,75%,50%,25%,1O%5个浓度梯度;采用上述材料浸提液培养 L-929 小鼠成纤维细胞 24 h,以含体积分数 10%DMEM 高糖培养液为空白对照,以含 5%二甲基亚砜 DMEM高糖 培养液为阳性对照组,观察细胞增殖及形态变化。2直接接触法:将 L-929小鼠成纤维细胞分别接种于海藻 酸钙止血敷料、明胶止血海绵、纳吸棉、普通纱布上培养 24h,观察细胞形态变化。 结果与结论:1浸提液法:不同浓度梯度海藻纤维止血敷料、纱布、纳吸棉浸提液的细胞毒性均为 1级,符 合 GB/T16886/ISO10993 医疗 器械 生物 学评 价标 准 ;1O0% ,75%明胶止 血海 绵浸提 液 的细胞 毒性 为 3级 , 严重抑制细胞增殖。2直接接触法:纱布与海藻纤维止血敷料的细胞毒性 1级,纳吸棉为 2级,明胶止血海 绵的细胞毒性为 3级。表 明海藻酸钙止血敷料无细胞毒性。 

海藻酸钙止血敷料与临床常用3种止血敷料体外细胞毒性的比较

引言 lntroduction 海洋生物资源海藻因具有储量丰富、可再生、无二次污染等特点,已成为研究者开发海洋资源的研究重点L1。。 海藻酸盐是从海带、马尾藻等褐海藻中分离得到的一种天 然多聚糖 ,属于 阴离子型共聚物 ,具有 良好 的生物相容性 与低毒性 ,并且有很强的成凝胶能力 】。以海藻酸盐为原 料开发的海藻酸钙敷料 ,以其优越 的保湿性、整体易去除 性、生物相容性等特性在各类伤 口护理中有着潜在应用价 值 , 己 成 为 生 物 医 学 的 研 究 热 点 J。 早 在 1 9 5 1 年 , B la in e 等就 已探讨 了海 藻酸盐作为可吸收止血材料 的可能性 j。海 藻 酸 在 医 用 敷 料 上 的 应 用 起 源 于 1962年 英 国 人 W inter等发 明 的 “ 湿 法 疗 法 ” 。 中 国 1 9 8 7 年 1 0 月 1 日 颁 布 实 施 的 卫 生部标准中包含海藻酸可用于人体组织 J,但目前有关海 藻酸钙敷料生物相容性的具体研究报道甚少 。

海藻酸盐作为伤 口止血敷料与人体组织及细胞外基质 直接接触,就要求其组成成分更接近人体组织基质成分, 低细胞毒性,低免疫原性,具备 良好 的生物相容性和降解 活性 ,利于细胞增殖与分化,无溶血作用等。为避免发 生不 良反应,敷料在应用于人体之前,必须对其生物安全 性 进 行 评 价 。 1948年 Bluth等 首 次 报 道 了 利 用 小 鼠 成 纤 维 细胞培养来筛选聚合物,开启了以细胞毒性实验来评价生 物 材 料 生 物 相 容 性 的 研 究 之 门 。 IS O 推 荐 使 用 该 细 胞 进 行细胞毒性实验。随着研 究者们孜孜不倦 的工作积累与 研究发现 ,使细胞毒性实验评价材料生物相容性的地位得 到公认l‘。 。体外细胞毒性实验 已成为医疗器械生物学评 价体系中基本 的评价指标之一,它能反映化学物质对细 胞基本结构或生理过程的作用,如细胞膜或细胞骨架结构 、 细胞新陈代谢过程、细胞组分或产物的合成、降解或释放 , 离子调控及细胞分裂等过程,导致细胞存活、增殖和,或功 能的紊乱所引发 的不 良反应l1。医疗器械样品的体外细胞 毒 性 检 测 通 常 按 照 G B,_r16886.5及 ISO 10993.5中 体 外 细 胞 毒 性 实 验 进 行 , 标 准 中 体 外 细 胞 毒 性 实 验 分 3 类 : 浸 提 液实验、直接接触实验和间接接触验。医用装置及材料 中

些易溶 出物质(原料单体 、低分子聚合物、催化剂、稳定 剂、乳化剂等)是引起毒性反应 的主要原因。

英 国皇家护理学院2005年 的压疮指南 中将敷料分为 以下5大类 :接触性敷料、主动性敷料、被动敷料、互动性

敷 料 、 抗 菌 性 敷 料 。 本 实 验 着 重 开 展 对 海 藻 酸 钙 敷 料 生物相容性的研究,细胞毒性实验采用浸提液法和直接接 触 法 , 用 C C K .8 法 检 测 其 与 现 有 其 他 几 类 医 疗 敷 料 的 细 胞 毒性,评估海藻纤酸钙止血敷料的临床应用潜能。明胶止 血海绵是 目前临床应用较为广泛的止血材料,主要用于外 科手术创面的止血,纳吸棉是耳鼻喉手术常用的止血材料, 纱布更是临床上常用的伤 口止血材料。将海藻酸钙止血敷 料与 目前临床常用3种材料的细胞毒性作对照,研究其细胞 毒 性 等 级 。

目前国内外对有关细胞毒性检查的标准均未做出明确 而详细的规定 ,这会使得 由于实验室设备差异和实验人员 技术操作不同而导致检验方法差异 ,进而使实验数据缺乏 可比性。检查方法的选择、细胞接种浓度、受试材料 的制备、细胞与受试材料间相互作用时间等因素的不同都 会影响实验结果 。本实验主要分析敷料浸提液浓度对体外 细胞毒性实验的影响。

1 材料和方法 Materialsandmethods
1.1设计 对比观察实验。
1.2 时间及地点 实验于2014年9月至2015年1月在青岛 大学医学院病原微生物实验室完成。
1.3 材料 小鼠成纤维细胞株L一929购于上海美轩生物科 技有 限公司。乳胶橡胶由海 门市扬子医疗器械有限公司提 供。

为 藻醪 由山东长运医药用品有限公司提供, 灭菌干燥后用纸塑密封保存 。藻酸盐医用敷料是一种从深 海海藻提取的海洋生物纤维,为具备生物相容性、抑 菌、高吸湿等特性 的高档敷料,适用于慢性伤 口的愈合 。

黟缆 应簿绵 由广州市快康医疗器械有限公司提供,, 产品胶原蛋 白含量,其中蛋 白质含量大于80%,灰分小于0.2%,产品吸水率大于80%,热源小0.5EU, 无菌,适用各种急救止血、 手术止血, 具有止血快 、填塞 创口及促进伤口愈合3大功效 。

勿 由建德市康华医疗器械有限公司提供,纳吸棉是高分子生物聚合材料一聚亚氨酯,是全新一代耳鼻喉科应用的高膨胀可吸收止血棉产品,其具有可降解吸收、高膨胀止血的特性,适用于耳鼻喉科等快速填塞止血 。

纱布由山东长运医药用品有限公司提供。

主要与器 : 胎牛血清、0.25 %胰蛋白酶(Gibco公司);DMEM高糖培养基(赛墨飞世尔生物化学有限公司); CCK-8(Signalway Antibody公 司 ); PBS、 二 甲 基 亚 砜 (青 岛大学医学院病原生物学实验室);倒置相差显微镜(奥林巴斯公司);多功能酶联免疫检测仪(SUNRISE公司);电子天平(Sartorius 公司) ; 超净工作台( 苏州净化 ) ; CO2 培养箱(德 I~ M em m ert); 离心机 (美 ~ Labnet)。