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含银藻酸盐敷料杀菌效果及安全性能研究

编辑:藻酸盐敷料小编 来源:藻酸盐敷料官网 发布时间:2017/5/9 10:15:45 浏览:107

【摘 要】 研究含银藻酸盐敷料的杀茵性能及相关安全性能。通过定量杀灭实验测定含银藻酸盐敷料的杀菌效果,依据《消毒 技 术 规 范 》(20 02)测 定 其 对 皮 肤 的 刺 激 性 。 结 果 表 明 :中 和 剂 能 有 效 中 和 含 银 藻 酸 盐 敷 料 中 杀 菌 成 分 ;含 银 藻 酸 盐 敷 料 对 大 肠 杆 茵 、金 黄 色 葡 萄 球 茵 、肺 炎 杆 菌 、粪 肠 球 菌 、化 脓 链 球 菌 的 杀 菌 率均大于90% ,而对白色念珠 菌 的杀菌率70%左右;含银藻酸盐敷料对完整皮肤无刺激性。含银藻酸盐敷料杀茵效果良好 ,对完整皮肤无刺激性 。 

【关键词】 杀菌;含银藻酸盐敷料;中和剂;皮肤刺激

 

1前肓 含银藻酸盐敷料是在藻酸盐敷料基础上,加入银离子,具有杀 灭并抑制细菌 的作用 ,有 助于产生一个抗菌环境 ,它能 透过细菌细胞膜阻断呼吸酶而起到广谱抗菌作用,并具有不易产生耐 药 的特点n ,且在水凝胶敷 料创造的湿润环境下 ,更加有 利于银离子的释放并发挥作用 。本文通过 中和剂鉴定 、载体定量杀灭实验 以及动物一次皮肤 刺激实验 ,研究 了含银藻 酸盐 敷料的杀菌性 能及安 全性能 ,为 含银藻酸盐敷料的应用提供基础数据 。

含银藻酸盐敷料杀菌效果及安全性能研究


实验方法 2.1 试验设备

压 力 蒸 汽 灭 菌 器 ;恒 温 培 养 箱 ;天 平 ,精 确 度 士 0 . g ;三 角 烧 瓶 ,配 盖 ;移 液 管 ;酒 精 灯 ;接 种 环 ;培 养 m ;冰 箱 。

2.2 试剂、培养基、缓冲液

营 养 琼 脂 ,磷 酸 盐 缓 冲 液 (pss),硫 代 硫 酸 钠 (分 析 纯 ),1% 大 豆 卵 磷 脂 (分 析 纯 ),3% 吐 温 80(分 析 纯 ),0.85% N aC I

2.3 菌种

大 肠 杆 菌 ATCC 2592 2,金 黄 色 葡 萄 球 菌 ATCC 6538,肺 炎

杆 菌 ATCC4352,粪 肠 球 菌 ATCC 1943,化脓 链 球 菌 ATCC 19615,白色念珠菌 ATCC1023l

2.4 实验步骤

2.4.1 中 和 剂 鉴 定 实 验 步 骤

中和剂成 分 :1%硫代硫 酸钠 、1%大豆卵磷 脂 、3%吐温 80作 用 时 间 lOmin。实验菌 ;金黄色葡萄球菌 ATCC6538,白色念珠菌 ATCC 1 0 2 3 1 。


实验分组如下 :

 l :吸取 0.5mL浓度 为 1.0×10cfu/mL的菌液接种 于裁切 成直径 4.8+0.1cm的样 片上 ,作 用 24h,加 100mL稀释液 ,振 荡 洗脱 ,采用平板稀释法 (稀 释液稀释)做活菌计数 。第 2组 :吸取 0.5mL浓 度为 1.0xl cfu/mL的菌液接 种 于裁切 成 直 径 4 . 8 .4- 0 . 1 c m 的 样 片 上 , 作 用 2 4 h , 加 1 0 0 m L 中 和 剂 , 作 用 10min,振荡 洗脱 ,采用平板稀释法 (稀 释液稀释 )做活菌计数。第 3组 :吸 取 0.5mL浓 度 为 1.0×10cfu/mL的菌 液 接 种 于 100mL中和剂中,作用 10min,采用平板稀释法(中和剂释)做活菌计数 。第 4 组 :吸 取 0.5m L 浓 度 为 1.0 × 10 cfu/m L 的 菌 液 接 种 于100mL中和产物溶液 中(样片加 lOOmL中和剂 ,作用 1Omin配 制 而 成 ),作 用 10ra in,采 用 平 板 稀 释 法 (中 和 产 物 溶 液 稀 释 )做 活 菌 计数。第 5组 :吸 取 0.5mL浓 度 为 1.0×10cfu/mL的菌 液 接 种 于 100mL稀释液中,作用 lOmin,采用平板稀释法(稀释液稀释)做活菌计数 。


 6  :分 别 吸 取 稀 释 液 、中 和 剂 各 lm L 于 同 一 无 菌 平 皿内 ,倒 入 上 述 实 验 同 批 次 的 培 养 基 25m L ,培 养 观 察 。 如 出 现 细 菌生长 ,可能提示 实验 材料或操作过程 中有污染 ,应重新进行 实 验。


2.4.2 抗 茵 实 验 步 骤

(1)将 样 品 、空 白 (已 灭 菌 )裁 切 成 直 径 4.8+0.1cm 的 圆 片 ,并 置 于 广 口 瓶 中 ,l / (3个 平 行 )

(2) 0.5mL工作浓度 为 1.0x1o6efu/mL细菌 培养液分别 接 种到试验 组和空 白对照组上 ,立 即在试验组 、空 白对 照组 和阴性 对 照组 中加 入lO0+lmL中和剂 ,充分 振荡 1min ,用平 板稀 释 法 测 定 试 验 组 、空 白 对 照 组 和 阴 性 对 照 组 ?0 ’接 触 时 间 的 菌 液 浓 度 。 将 平 板 于 3 7 .-4 2 °C 培 养 4 8 h , 菌 落 计 数 。

(3) O.5mL工作 浓度为 1.O×lo6cfu/mL细 菌培养液分别 接 种到试验组和空 白对照组上 ,密封 ,37:t:2qc下培养 24h 144h

( 4 ) 在 培 养 2 4 h 后 的 试 验 组 和 空 白 对 照 组 中 分 别 加 入 1 0 0 .4- lm L 中 和 剂 ,充 分 振 荡 1ar in  ,用 平 板 稀 释 法 测 定 试 验 组 、空 白

对 照 组 的 菌 液 浓 度 。 将 平 板 于 37+2°培 养 48h,菌 落 计 数 。 (5)将 0.5mL32作浓 度为 1.O×10cfu/mL细菌培 养液再次 接 种到 培养 了14h的试验组 和空 白对 照组上 ,密封 ,374-2°C下培

 24h

(6)再次 接种并 培养 了24h的试验组 和 空 白对 照组 中加入1 0 0 + l m L 中 和 剂 , 充 分 振 荡 1 ra i n  , 用 平 板 稀 释 法 测 定 试 验 组 、 空白对照组的菌液浓 度。将平 板子372°C培养 48h,菌落计 数。

2.4.3 皮肤刺激实验

 

实 验 动 物 :广 东 省 医 学 实 验 动 物 中 心 提 供 的 H artly 豚 鼠 ,体 重 :250左 右 。 许 可 证 号 :scxK ( )2008.0 002

检测方 法州:Hartly豚 鼠 3 ,雌性 ,在试验前 24h,用脱 毛剂 将 豚 鼠 背 部 脊 柱 两 侧 的 毛 去 掉 ,不 损 伤 皮 肤 。 去 毛 范 围 约 3em x 3cm 。 次 日 将 受 试 样 品 剪 成 2.5em × 2.5cm 大 小 ,敷 贴 在 一 侧 去 毛皮肤上 ,另一侧作为空白对照 ,作用4h,去除受试样品后 lh 24h48h观察皮肤局部反应并进行评分。

2.5 结果计算与评价

2.5.1 中和荆鉴定结果评价

中 和 剂 鉴 定 结 果 评 价 依 据 《消 毒 技 术 规 范 》(20 02年 版 ) 2.1.1.5中 和 剂 鉴 定 实 验 。

2.5.2 杀菌率计算

杀菌率计算依据AATCC10.204织物材料中抗菌整理剂的鉴定。2.5.3皮肤刺激评分与判定标准  将无红斑、勉强可见红斑、明显可见严重红斑、紫红色红斑

伴 焦 痂 形 成 分 别 记 为 01234 ;无 水 肿 、勉 强 可 见 、皮 肤 隆 起 轮廓 清楚 、水 肿隆起约 1mm、水肿隆起超 lmm等分别记 为0l 234 ;皮肤 刺激 指数 0-0.5为无 刺激性 ,0.5-2.0为轻度刺激 性 , 2 .0 .0 为 中 度 刺 激 性 , 6 .0 ~ 8 .0 为 强 刺 激 性 。

实验结果

3.1 中和剂鉴定实验

由表 1 2可 以看出 ,细菌和真菌 3次 中和剂鉴定结果 中 , l组无菌生 长 , 2组较第 1组多 ,但较第 345组少 ,且第 345组 组 间 菌 落 误 差 率 ≤ 15% ,第 6 组 不 长 菌 ,说 明 采 用 1% 硫 代 硫 酸 钠 +1%大 豆卵磷脂 +3%吐温 80组 成 的中和剂 lOmL,作 用时 间10ra in 能 有 效 去 除 含 银 藻 酸 盐 敷 料 对 细 菌 和 真 菌 的 残 留 作 用 。 中和剂本身及其产物对培养基、细菌和真菌生长无影响,符合中 和剂选择要求。


3.2 含银藻酸盐敷料抗菌效果实验

由图 1可 以看 出 ,含银 藻酸盐敷料对 大肠杆菌 、金黄色葡萄球 菌 、肺 炎 杆 菌 、粪 肠 球 菌 、化 脓 链 球 菌 的 杀 菌 率 较 好 ,24h测 得 的 杀 菌 率 均 达 到 9 9% 以 上 ,144h再 次 接 种 测 得 的 杀 菌 率 有 所下降 ,但均 达到 90%12A_ln。而含银藻酸盐 敷料对 白色念珠菌 的杀 菌效果较差 ,仅能到达 70%左右 。


结论

本 文研究 了含银 藻酸盐 敷料的杀 菌性 能及相关 安全性能 。

结 果表 明 ,采用 1%硫代硫 酸钠+1%大豆卵磷 脂+3%吐温 80组成 的中和剂 10mL,作用时间 10min能有效去除含银藻酸盐敷料对 细菌和真菌的残留作用;含银藻酸盐敷料对大肠杆菌、金黄色葡 萄 球 菌 、肺 炎 杆 菌 、粪 肠 球 菌 、化 脓 链 球 菌 的 杀 菌 率 较 好 ,24h测 得的杀菌率均 达到 99%以上 ,144h再次 接种测得 的杀菌率有所 下 降 ,但 均 达 到 90% 以 上 。 而 含 银 藻 酸 盐 敷 料 对 白 色 念 珠 菌 的 杀 菌 效 果 较 差 ,仅 能 到 达70%左 右 ;含 银 藻 酸 盐 敷 料 对 完 整 皮 肤 无刺激性 。

参考文献

?苏 天 兰 ,时 利 群 ,李 伟 人 , .银 离 子 敷 料 在 感 染 伤 口 的 应 用 效 果 观 察 U 1、 贵 阳 医 学 院 学 报 ,2010,35(4):390-391..

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